사전 하이브리드 화 및 꽁 머니 카지노 라벨링

프리 하이브리드 화

1. 하이브리드 화 오븐을 65 ° C로 설정하십시오.
2. 해동³²P 후드의 동위 원소.
3. 멤브레인을 하이브리드 화 튜브에 배치하십시오.
4. 각 튜브에 50 ml의 선사기 버퍼를 추가하십시오.

사전 하이브리드 화 버퍼[4 개의 꽁 머니 카지노의 경우]

DDH20	125 ml
20X SSPE	60 ml
100X Denhardt의 카지노	10 ml
20% SDS	5 ml
100X Denhardt의 카지노 커뮤니티[10 mg/ml; 5 분 동안 끓여서 5 분 전에 얼음 위에 놓기]	1 ml
Total	200 ml

1. 선사의 사전 하이브리드 멤브레인은 최소 6 시간에서 밤새.

꽁 머니 카지노 라벨링

1. 핫 플레이트의 비이커에 끓는 물을 가열합니다.
2. 꽁 머니 카지노 구성 요소는

레이블링 구성 요소

DNA	1.0 µL [20–50 ng]
DDH20	4.0 µL [총 부피20 및 꽁 머니 카지노 = 5 µL]
100X Denhardt의	1.0 µL
dntps [5 mm]	1.5µL
Klenow 폴리머 라제	1.0 µL
10X KLENOW 버퍼	1.5µL
DCTP32P	5.0 µL
Total	15.0 µL

1. Conbine DDH₂0, 1.5ml 마이크로 포지 튜브의 Oligo Primer 및 DNA, 4 분 동안 끓인 다음 얼음 위에 놓습니다.
2. DNTPS, 10X 버퍼, Klenow 효소 및 추가³²p. 섞고, 회전하고, 반응을 실온에서 밤새 또는 37 ° C에서 2 시간 동안 배치하도록 반응하십시오..

열 준비

1. 1ml 주사기의 바닥에 유리 울을 추가하고 15ml 원심 분리 튜브에 넣습니다.
2. 전송 피펫을 사용하여 주사기에 솔루션을 채우십시오마카오 카지노 후기 DNAte. 기둥에 기포를받지 마십시오.
3. ~ 30 초 동안 원심 분리기 튜브, 신선한 튜브 리필마카오 카지노 후기 DNA용액 및 4 분 동안 1,500 rpm에서 원심 분리하십시오.
4. 각 컬럼에 200 ㎕의 TE를 추가하고 1,500 rpm에서 4 분 동안 원심 분리합니다.

꽁 머니 카지노 정화

1. 각 꽁 머니 카지노에 185 ㎕의 TE를 추가하십시오.
2. 튜브에서 캡을 자르고 피펫으로 튜브에서 모든 꽁 머니 카지노 솔루션을 철수하십시오. 주사기 아래에 빈 튜브를 놓고 열의 상단에 꽁 머니 카지노를 추가합니다.
3. 1,500 rpm에서 4 분 동안 열을 돌립니다.
4. 열을 버립니다. Pruified 꽁 머니 카지노로 튜브를 제거하고 요약합니다.
5. 튜브에 캡 잠금 장치를 추가하고 4 분 동안 끓인 다음 얼음 위에 놓습니다.