모노 코트 강남 카지노에 대한 강남 카지노 소화 및 남부 하이브리드 화 절차
강남 카지노 소화
- 다음과 같이 칵테일을 만듭니다 :
10 x 버퍼 |
3.50 µL
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BSA [주식 : 10 mg/ml] |
0.35 µL
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DDH20 |
5.65 µL
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RNase [스톡 : 100 mg/ml] |
0.50 ml
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ECORI [12 단위/µL] |
10.00 µL
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Total |
20.00 µl/튜브
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- 20 μL의 칵테일을 함유 한 각 튜브에 15 μL [20–25 μg] 강남 카지노를 추가하십시오. 섞는 몇 번 피펫.
- 37 ° C 오븐에서 샘플을 밤새 (최소 10 시간) 인큐베이션합니다.
강남 카지노 하이브리드 화
- 30 분 동안 50 μl의 10 mg/ml 에티 디움 브로마이드를 가진 얼룩 겔과 사진.
- 부드러운 흔들림으로 실온에서 25 분 동안 1 L의 0.25m HCl로 겔을 처리합니다.
- 증류수로 두 번 린스 젤을 헹구고 20 분 동안 1 L 0.4m NaOH로 처리하여 부드럽게 흔들립니다.
- 2 L 0.4m Naoh로 유리 접시를 채우고 유리 판을 상단 위에 강남 카지노. 말단이 액체에 침지되도록 플레이트 위에 3mm 크로마토 그래피 용지의 '23 x 30 cm '조각을 배치하십시오 [Wick'].
- 습식 2 '22 .5 x 22.5 cm '크로마토 그래피 용지 시트 0.4m naoh가있는 시트 위에 강남 카지노. 4 단계에서와 같이 기포 제거
- 젤을 종이 상단 표면에 놓은 다음 나일론 멤브레인을 젤에 강남 카지노. 겔을 막의 정확한 크기로 트림.
- 두 젤 반쪽 사이에 플라스틱 스트립을 강남 카지노.
- 습식 2 '10 x 20 cm '크로마토 그래피 용지와 막 위의 장소. 4 단계에서와 같이 기포 제거
- 증발을 방지하고 모세관 이동이 젤을 통해서만 있는지 확인하기 위해 플라스틱 랩이있는 젤을 제외한 모든 영역을 덮습니다.
- 젤 영역 위에 큰 종이 타월 더미를 강남 카지노. 종이 타월 더미에 유리 판을 넣고 접시 위에 무게를 강남 카지노.
- 5-10 분 동안 2x SSC를 가진 램프 린스 멤브레인. 즉시 사용하거나 습식을 저장하십시오.
나일론 전달 멤브레인 : hybond-xl 니트로 셀룰로스 막, 카탈로그 # rpn203s; GE Healthcare, 800 Centennial Avenue, P.O.http : //www5.gelifesciences.com.