Monocot DNA 일본 카지노

1. 신선한 조직을 모아 -20 ° C에 보관하십시오.
2. 프리 릴 모르타르에서 액체 질소가있는 미세한 분말로 잎 조직을 갈아냅니다.
3. 냉각 된 붓으로지면 조직을 잘 채워진 50일본 카지노 폴리 프로필렌 튜브로 전달하고 -20 ° C에 저장하십시오.분말이 해동하지 마십시오.모든 도구는 액체 질소에서 차가워 야합니다.
4. 추출 완충액에 바이 설 파이트 나트륨을 첨가하고 5N NAOH로 pH를 7.8–8.0으로 조정하십시오. 추출 완충액을 65 ° C로 가열하고 15-20 일본 카지노에 10-15 일본 카지노의 냉동 조직을 첨가하십시오.

1. 30 분 동안 65 ° C 수조에서 배양; 5-10 분마다 튜브를 뒤집습니다.
2. 클로로포름 추가 : 이소 아밀 알코올 [24 : 1 v/v] 튜브 상단에 격렬하게 섞습니다.
3. 원심 일본 카지노기 4,500 rpm에서 15 분. 간기가 고체되지 않은 경우 2-4 층의 치즈 클로스 또는 피펫을 쏟아 부어 상위 위상을 새로운 50ml 튜브로 옮깁니다.
4. 감기 [-20 ° C] 95% ETOH의 2 권 (위에 채우는 튜브)을 추가하고 부드럽게 혼합하여 일본 카지노를 침전시킵니다. 30-60 분 동안 -20 ° C에 배치
5. 95% ETOH를 쏟아 부어 신선한 70% ETOH로 세척 한 다음 30일본 카지노의 차가운 70% ETOH를 첨가하십시오. 몇 분 동안 부드럽게 섞으십시오.
6. 일본 카지노가 여전히 변색 된 경우 신선한 70% etoh로 다시 세척하십시오. 파스퇴르 피펫에 연결하여 일본 카지노를 제거하고 Kimwipe로 과도한 70% etoh를 꺼내십시오.
7. 일본 카지노 용해멸균te [펠렛 크기에 따라 0.5–1 ml]. 30 ~ 60 분마다 또는 일본 카지노가 용해 될 때까지 온화한 역전으로 용해 될 때까지 65 ° C 수조에서 배양하십시오.
8. 13,000 rpm에서 미세 원심 일본 카지노기에서 10 분 동안 용액으로 들어 가지 않는 물질을 제거합니다.
9. 마커 (10, 20, 50 및 80 ng의 농도에서 Uncut Lambda DNA)와 함께 1:20 희석 [1 DNA : 20 TE : 1 하중 완충액 용액]을 일본 카지노하여 DNA 농도를 결정합니다. 15 분 동안 0.5 μg/ml의 에티 디움 브로마이드와 함께 겔을 염색하고 사진을 찍습니다.